胰腺癌是嚴重危害人類健康的惡性腫瘤之一，死亡率與發病率之比達0.95/1。 2011年發布的全球腫瘤統計數據顯示，在常見惡性腫瘤中,胰腺癌的發病率和死亡率分別位居第13位和第7位,並呈現明顯的上升趨勢。在中國，以上海為例，胰腺癌的發病率已達中等發達國家水平，死亡率已躍居第5位。85%的胰腺癌患者在獲得診斷時已處於疾病的晚期，使多數患者失去了手術根治的機會，即使經過積極的綜合性治療，其中位生存期也僅為6~9個月，因此早診斷是提高胰腺癌療效的最重要手段。

　　然而，早期胰腺癌患者缺乏特異性症狀，臨床檢出和診斷困難，因此對腫瘤標誌物的探索已成為當下胰腺癌早期診斷的研究熱點。CA19-9是目前胰腺癌最常用的臨床診斷標誌物，其敏感性和特異性分別為93.1%和78.3%。胰腺癌患者的血清CA19-9水平通常是正常值的3倍以上或呈持續升高的狀態，但在某些良性膽道和胰腺疾病（例如急慢性胰腺炎、肝炎和膽道梗阻）患者中，CA19-9水平也會升高。其他的腫瘤標誌物如癌胚抗原（CEA）、CA242等，因其敏感性和特異性低而在臨床上使用受限。鑒於胰腺癌早期診斷標誌物的重要性以及缺乏相關的數據，探索新型腫瘤標誌物就顯得愈發迫切，本文將就此展開綜述。

　　抗體微陣列技術

　　抗體微陣列是蛋白質微陣列技術的一種，是將抗體作為捕獲分子固定於載體表麵來進行免疫分析的技術。

　　霍艾澤爾（Hoheisel）等建立了胰腺癌抗體微陣列平台，並采用彩色預染蛋白質分子量標準，對胰腺癌患者和健康對照者的血液和尿液進行分析，結果獲得了很高的準確性和可重複性。其優勢在於不需要預先去除血液中的脂質和高豐度的蛋白質，從而簡化了流程，節約了時間，同時避免了樣本處理所致的偏倚。

　　桑奇茲（Sanchez）等發現，包含254個抗體的微陣列在檢測血清蛋白表達譜時，敏感性可高達93.7%，並且通過免疫組化、組織芯片技術驗證了血清蛋白中差異表達最高的c-met與胰腺癌患者的分期、生存率相關。這些研究結果為胰腺癌免疫診斷芯片的開發奠定了一定的基礎。

　　上述研究表明，抗體微陣列技術在生物標誌物篩查中具有應用前景，但將其廣泛用於臨床還有待進一步的研究和完善。

　　蛋白標誌物

　　黃（Hwang）等通過免疫組化分析發現，胰腺癌組織中UL16結合蛋白2（ULBP2）的水平比鄰近的正常胰腺組織高，並且所有胰腺癌患者的血清ULBP2水平均顯著高於健康人群 （P＜0.0001）。中國台灣長庚大學研究者的研究結果表明，在胰腺的早期診斷中，ULBP2的診斷效果（敏感性和特異性）優於CA19-9，二者聯合診斷胰腺癌的效果比單用任何一種標誌物都更佳。對於其他腫瘤例如胃癌、結直腸癌以及鼻咽癌，並沒有發現ULBP2水平的增高。

　　高遷移率族蛋白A1（HMGA1）是依靠cDNA微陣列技術發現的另一種潛在的腫瘤標誌物。它是一種結構性轉錄因子，通過與DNA分子結合來調節基因的表達。多數胰腺導管腺癌存在KRAS 基因突變，該突變使下遊信號通路出現異常，最終導致了腫瘤的發生。研究人員的早期研究顯示，在90%以上胰腺導管腺癌患者的癌組織中，HMGA1水平顯著升高，其通過調節Ras/ERK信號通路來產生致癌效應。特雷夫（Treff）等采用RNA靶向幹擾法來降低胰腺癌細胞HMGA1的表達，結果發現癌細胞的侵襲性和增殖能力均顯著下降，同時出現了對藥物的增敏作用，而在對照組中胰腺癌細胞出現了抵抗依賴細胞基質的凋亡現象。此外塔爾貝（Tarbe）等發現，在胰腺導管腺癌中，HMGA1基因的高表達與癌細胞的轉移潛能相關。

　　在胰液中尋找胰腺癌早期診斷標誌物也取得了一定的進展。中國山東省醫學科學院的研究者通過蛋白質印跡技術，分別對9例胰腺導管腺癌患者和健康對照者的胰液進行了分析，結果發現在胰液內差異表達的幾種蛋白中，胰腺導管腺癌患者的基質金屬蛋白酶9（MMP-9）的表達上調，顯著高於健康對照者。後續的研究對不同人群的血清MMP-9水平進行了比較，結果表明，胰腺導管腺癌患者的血清MMP-9水平顯著高於慢性胰腺炎患者（P=0.009）和健康人群（P=0.027）。這些研究結果為MMP-9作為早期診斷標誌物提供了依據。

　　微小RNA（miRNA）

　　miRNA是長度約為21 nt的無編碼功能的小分子RNA，其通過和靶 mRNA特定序列互補或不完全互補結合，誘導靶mRNA降解或阻止其翻譯而發揮作用。在真核細胞的基因表達、細胞發育分化等方麵，miRNA起著重要的調控作用，同時也有望成為胰腺癌早期診斷的重要生物標誌物。

　　miRNA在包括胰腺癌的多種腫瘤中發揮重要作用。研究者通過細針穿刺對可疑胰腺癌患者的組織進行了分析，結果發現miRNA-217僅存在於健康人體的胰腺組織中，而miRNA-196a僅出現在胰腺導管腺癌患者的組織中，並且二者均呈現出極高的特異性。後續的研究表明，胰腺導管腺癌患者癌變組織中的miRNA-196a含量越高，患者的生存期就越短。戈金斯等的研究結果顯示，在胰腺癌和慢性胰腺炎患者中，血清miRNA-200a和miRNA-200b的水平顯著升高。

　　2011年，有學者報告，通過對miRNA-196a、miRNA-210、miRNA-375等的檢測，可將胰腺導管腺癌診斷的準確性提高2~3倍。

　　目前有越來越多的研究結果顯示了miRNA在胰腺癌早期診斷中的前景，但由於miRNA種類、結構的多樣性以及受到現有技術的製約，將miRNA用於胰腺癌的早期診斷還有待進一步的研究。

　　基因相關標誌物

　　胰腺癌的發生發展是遺傳和表遺傳突變不斷積累的過程，這已經得到全基因組關聯研究（GWAS）以及日本研究結果的證實。

　　一項對胰腺癌患者（n=3851）和健康對照者（n=3934)的551766個單核苷酸多態性（SNP）進行的研究顯示，8個分布於3個染色體區域的SNP可影響胰腺癌的發病風險，兩個SNP位於染色體13q22.1的非轉錄區（Kruppel樣轉錄因子KLF5和KLF12之間），KLF5在胰腺癌中過表達，從而介導非KRAS/RAF/MAPK/ERK信號傳導通路。5個SNP位於染色體1q32.1的105kb區域，包含NR5A2基因，該基因與胰腺的發育和內穩態有關，也和脂聯素基因的激活相關，這進一步確立了肥胖與胰腺癌發病風險增加的相關性。1個SNP位於染色體5p15.33的CLPTM1L基因的內含子上，CLPTM1L與腫瘤的 發生相關。

　　在日本人群中進行的第一項GWAS分析顯示，與胰腺癌相關的SNP位於3個染色體（6p25.3、12p11.21和7q36.2）區域，這些SNP與胰腺癌發病風險的中度增加相關。

　　上述研究均為回顧性的，為了讓這些研究結果更好地用來預測胰腺癌的發病風險，還需要將這些基因標誌物與流行病學危險因素結合起來，並進行前瞻性研究。

　　■小結

　　雖然有關胰腺癌早期診斷標誌物的研究已取得了一定的進展，但多為回顧性研究，尚缺乏有關敏感性、特異性及安全性的數據。隨著轉化醫學研究的不斷深入，相信不久的將來一定會取得重要突破。