皮膚光老化是紫外線照射引起的皮膚外源性老化，真皮膠原減少是其最重要的病理學特征之一。皮膚Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白是構成皮膚真皮細胞外基質最主要的蛋白成分。
皮膚光老化是紫外線照射引起的皮膚外源性老化，真皮膠原減少是其最重要的病理學特征之一。皮膚Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白是構成皮膚真皮細胞外基質最主要的蛋白成分。miRNA-29家族(miR-29)是主要調控人體內膠原表達的一類miRNA分子。最近研究發現，在自然衰老皮膚的真皮組織中miR-29表達上調，但膠原含量下調，提示miR-29上調可能與真皮膠原合成減少有關。宋曉婧等通過研究miR-29(miR-29a-3p、miR-29b-3p和miR-29c-3p)在慢性光損傷人皮膚成纖維細胞(HDF)中的表達及其對Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白合成的影響，進一步揭示光老化的機製。
將人皮膚成纖維細胞分為未照射組和慢性光損傷組，後者給予長波紫外線(UVA)連續照射以構建慢性光損傷細胞模型，並用流式細胞儀及β半乳糖苷酶染色法驗證模型。Western印跡檢測兩組Ⅰ型和Ⅲ型膠原蛋白的表達，實時熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測miR-29家族3個成員(miR-29a-3p、miR-29b-3p和miR-29c-3p)在兩組細胞中的表達，選擇表達具有顯著差異的miR-29c-3p進行功能試驗。將人皮膚成纖維細胞分為4組，分別采用熒光標記的miRNA-29c-3p模擬物(過表達組)、抑製物(抑製組)及二者各自的對照RNA寡核苷酸(陰性對照組和抑製對照組)轉染各組細胞，觀察各組熒光細胞比例，qRT-PCR法檢測各組miR-29c-3p的相對表達量，判定幹擾效率。采用qRT-PCR法檢測轉染後4組COL1A1和COL3A1 mRNA水平，Western印跡法檢測轉染後Ⅰ和Ⅲ型膠原蛋白表達水平。
與未照射組相比，慢性光損傷組衰老染色細胞陽性率顯著升高(36.47% ± 3.20%比12.56% ± 1.46%，P < 0.01)，G1期細胞比例明顯升高，S期細胞比例明顯降低(均P < 0.01)，慢性光損傷模型成功建立。慢性光損傷組Ⅰ和Ⅲ型膠原蛋白表達(0.40 ± 0.19和0.52 ± 0.10)明顯低於未照射組(1.00 ± 0.12和1.00 ± 0.10，均P < 0.01)，而miR-29c-3p(4.42 ± 2.05)明顯高於未照射組(0.89 ± 0.10，P < 0.05)，兩組間miR-29a-3p和miR-29b-3p表達水平差異無統計學意義(均P > 0.05)。轉染後24 h，過表達組和抑製組的轉染效率均大於90%，達到幹預要求。過表達組miR-29c-3p的表達(224.17 ± 2.00)明顯高於陰性對照組(2.45 ± 0.34)，而抑製組(0.20 ± 0.08)明顯低於抑製對照組(2.24 ± 0.14)，幹擾模型構建成功。評價轉染效率顯示，過表達組COL1A1和COL3A1 mRNA和Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達水平均明顯低於陰性對照組和抑製組(均P < 0.05)，而抑製組明顯高於抑製對照組(均P < 0.01)。
miR-29c-3p在慢性光損傷皮膚成纖維細胞中表達上調，可能通過調控COL1A1、COL3A1的表達影響Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白合成。
來源：miRNA-29c-3p對體外慢性光損傷皮膚成纖維細胞COL1A1和COL3A1基因表達及Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白合成的影響[J].中華皮膚科雜誌，2017，50(12)：869-874
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