日前，泰安市中心醫院血液科的孫兆剛、付鵬和劉愛華等研究人員共同發表論文，旨在構建人肌細胞增強因子2C(MEF2C)慢病毒表達載體並檢測其表達性能，以便應用過表達技術進一步研究MEF2C的功能。研究指出成功構建MEF2C慢病毒表達係統，為應用過表達技術探索其在腫瘤發生和發展中的作用奠定了基礎。該文章發表在2012年20期的《中華臨床醫師雜誌》上。
日前，泰安市中心醫院血液科的孫兆剛、付鵬和劉愛華等研究人員共同發表論文，旨在構建人肌細胞增強因子2C(MEF2C)慢病毒表達載體並檢測其表達性能，以便應用過表達技術進一步研究MEF2C的功能。研究指出成功構建MEF2C慢病毒表達係統，為應用過表達技術探索其在腫瘤發生和發展中的作用奠定了基礎。該文章發表在2012年20期的《中華臨床醫師雜誌》上。
以人MEF2C基因序列為模板合成其編碼框序列，通過限製性內切酶NotⅠ和NsiⅠ酶切、T4DNA連接酶連接，將MEF2C插入慢病毒載體質粒LV5-GFP，構建人MEF2C基因重組慢病毒質粒載體，轉化感受態細菌，篩選陽性克隆，與包裝質粒通過脂質體共轉染人胚腎細胞係293T，進行慢病毒包裝並測定病毒滴度。病毒感染293T細胞，熒光顯微鏡下觀察感染效率，PCR方法檢測MEF2C mRNA的過表達情況。
成功構建慢病毒表達載體LV5-MEF2C-GFP，三質粒共轉染293T細胞後形成假慢病毒顆粒；濃縮假病毒後測定其滴度為2×109TU/ml；以複感染係數MOI為5感染293T細胞，感染效率在70%以上。PCR證實感染帶有目的基因假病毒的293T細胞表達MEF2CmRNA的水平較感染陰性對照病毒的293T細胞表達水平明顯升高(t=11.93，P=0.000)。
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