日前,天津醫科大學眼科臨床學院,天津市眼科醫院,天津市眼科研究所,天津市眼科學與視覺科學重點實驗室包秀麗、宋慧、湯欣共同發表文章,旨在研究Wnt3a促進人晶狀體上皮細胞上皮間充質轉化的作用,並探討相關分子機製。研究表明,在人晶狀體上皮細胞SRA01/04中,Wnt3a過表達使Wnt/β-catenin信號通路活化,誘導細胞發生上皮間充質轉化,增強運動遷移能力。該文發表在《中華眼科雜誌》2012 年第35卷第4期上。
日前,天津醫科大學眼科臨床學院,天津市眼科醫院,天津市眼科研究所,天津市眼科學與視覺科學重點實驗室包秀麗、宋慧、湯欣共同發表文章,旨在研究Wnt3a促進人晶狀體上皮細胞上皮間充質轉化的作用,並探討相關分子機製。研究表明,在人晶狀體上皮細胞SRA01/04中,Wnt3a過表達使Wnt/β-catenin信號通路活化,誘導細胞發生上皮間充質轉化,增強運動遷移能力。該文發表在《中華眼科雜誌》2012 年第35卷第4期上。
研究構建Wnt3a cDNA表達載體,采用脂質體介導轉染技術將Wnt3a cDNA表達載體瞬時轉染入人晶狀體上皮細胞係SRA01/04細胞中,對照組轉入pcDNA3-HA表達載體,蛋白印跡法測定驗證過表達效果;蛋白印跡法及免疫熒光染色檢測晶狀體上皮細胞中β-catenin的表達和定位變化,以及細胞上皮表型標記物E-cadherin和間質表型標記物纖維連接蛋白的表達;體外劃痕實驗及Transwell小室遷移實驗檢測Wnt3a過表達對SRA01/04細胞的遷移運動能力的影響。組間計量資料的比較,采用Student's t檢驗分析。
結果顯示,通過構建人Wnt3a cDNA表達載體獲得Wnt3a過表達的Wnt3 a/SRA01/04細胞及對照pcDNA3-HA/SRA01/04細胞。Wnt3a過表達促使SRA01/04細胞內的β-catenin細胞定位由胞質轉入胞核;使晶狀體上皮細胞發生上皮間充質轉化(上皮表型E-cadherin表達降低,間質表型纖維連接蛋白表達升高)。體外劃痕試驗中劃痕24 h後測得Wnt3 a/SRA01/04細胞的遷移距離是(0.36 ±0.02)mm,明顯高於對照組(t=21.98,P<0.01);Transwell小室遷移試驗中48 h後穿過聚碳酸酯膜的Wnt3 a/SRA01/04細胞數為(92.25±10.34)個,明顯多於對照組(t=10.40,P <0.01),證明Wnt3 a/SRA01/04細胞的運動遷移能力大大增強。
copyright©醫學論壇網 版權所有,未經許可不得複製、轉載或鏡像
京ICP證120392號 京公網安備110105007198 京ICP備10215607號-1 (京)網藥械信息備字(2022)第00160號