血液

同位素稀釋液相色譜串聯質譜法測定血清可替寧

作者:陳小姣 整理 來源:醫學論壇網 日期:2012-10-24
導讀

         日前,衛生部北京醫院和衛生部臨床檢驗中心的研究人員共同發表論文,旨在建立一種同位素稀釋液相色譜串聯質譜(ID-LC/MS/MS)測定血清可替寧的方法,以評價不同吸煙狀況健康人的吸煙暴露水平分布狀況。本研究建立的ID-LC/MS/MS測定血清可替寧方法操作簡便、特異、靈敏,可望在吸煙暴露水平評價及暴露與疾病發生危險的研究中提供有效技術平台。該文章發表在2012 年35卷04期的《中華檢驗醫學雜誌》上。

  日前,衛生部北京醫院和衛生部臨床檢驗中心的研究人員共同發表論文,旨在建立一種同位素稀釋液相色譜串聯質譜(ID-LC/MS/MS)測定血清可替寧的方法,以評價不同吸煙狀況健康人的吸煙暴露水平分布狀況。本研究建立的ID-LC/MS/MS測定血清可替寧方法操作簡便、特異、靈敏,可望在吸煙暴露水平評價及暴露與疾病發生危險的研究中提供有效技術平台。該文章發表在2012 年35卷04期的《中華檢驗醫學雜誌》上。

  以[D3]-可替寧作內標,乙腈沉澱蛋白、離心後吸取上清液、氮氣揮幹、流動相重組,液相分離後進人串聯質譜分析;然後,采用多離子反應監測模式,以標準品製作標準曲線,結合同位素內標法定量建立同位素稀釋液相色譜串聯質譜法。用以對0 68、48.42、94.34、250.95、287.04 μg/L 5個水平血清樣本進行5次重複分析,每次每種血清重複分析3份,以考察方法的精密度;同時測定與評價血清樣本添加不同濃度標準品的加樣回收率和樣本在常溫、4℃、-80℃保存的穩定性,以及2010年10月至12月期間94名健康誌願者在不同吸煙狀況下的血清可替寧分布情況。並用Mann-Whitney U檢驗分析60名非吸煙、14名戒煙與20名吸煙健康誌願者血清可替寧含量的差異。

  用ID-LC/MS/MS檢測血清可替寧在本試驗條件下分離良好,無內源性物質的幹擾,具有較好的特異性;血清可替寧、內標峰麵積比與可替寧濃度的線性相關係數≥0.9993;測定5個水平血清樣本的總變異係數(CV)分別為4.71%、1.40%、1.98%、1.10%和1.03%;批內CV分別為2.19%、0.78%、0.75%、0.65%和0.67%,ID-LC/MS/MS的檢測限(LOD)和定量限(LOQ)分別為0.013和0.050 μg/L,具有較高的靈敏度;3次試驗的加樣回收率範圍為99.22% ~ 102.67%;樣本在常溫條件下放置2d、4 ℃放置7d以及-80℃凍存保存3個月測定結果的準確度為99.28%~ 100.87%,批間CV均<5%。檢測94名健康人血清可替寧水平呈偏態和尖態分布(偏度2.71,峰度6.65),其中,20名吸煙者的可替寧濃度為116.40 (63.17 ~241.12) μg/L,14名已成煙者為0.67 (0.15~0.95) μg/L,60名非吸煙者為0.22 (0.15 ~0.42) μg/L;已戒煙者(Z=-2.12,P<0.05)和吸煙者(Z=-6.67,P<0.001)血清可替寧濃度分別顯著高於非吸煙者。
 

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