中山大學附屬第一醫院心髒外科劉雲奇、楊嵩、張希等共同發表論文,旨在研究在體外培養心肌組織過程中,心髒幹細胞生長的微環境及其生物學特性。研究指出,心肌組織體外培養可便捷獲取心髒幹細胞,心髒幹細胞的生長、增殖過程伴隨細胞外基質的降解,其在體外培養過程中有自動分化傾向。該文章發表在2012年第28卷第6期《中華胸心血管外科雜誌》上。
中山大學附屬第一醫院心髒外科劉雲奇、楊嵩、張希等共同發表論文,旨在研究在體外培養心肌組織過程中,心髒幹細胞生長的微環境及其生物學特性。研究指出,心肌組織體外培養可便捷獲取心髒幹細胞,心髒幹細胞的生長、增殖過程伴隨細胞外基質的降解,其在體外培養過程中有自動分化傾向。該文章發表在2012年第28卷第6期《中華胸心血管外科雜誌》上。
選擇8周齡SD大鼠,心肌組織切碎後依次用胰酶和膠原酶消化,收集組織塊培養,待新生細胞鋪滿容器底時傳代。取第3代幹細胞行免疫熒光染色檢測相關分子標誌物的表達。培養基中加入EdU標記的增殖細胞後,培養的組織行HE染色、Masson染色、免疫熒光染色及TUNEL細胞凋亡檢測。
結果顯示,心肌組織培養7~10天後有明亮的圓形細胞長出,其在體外培養過程中具有自動分化傾向。免疫熒光檢測示:分裂象細胞c-kit陽性;多數細胞o-sarcomeric actin、cardiac troponin T、flk-1、vemintin陽性;部分細胞α-smooth muscle actin、connexin-43、CD31、CD45陽性,CD90陰性。培養的組織塊切片後染色見大量新生細胞生長的同時伴隨心肌細胞的凋亡,心肌間膠原纖維重塑;增殖期細胞EdU染色陽性;MMP-2、MMP-9及TGF-β1在心肌組織表達豐富,而在增殖細胞則較少表達。
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