近期，NEJM刊登了一封讀者來信：《在患者淋巴結直接注射自身抗原以治療1型糖尿病》，淋巴結內注射抗原，居然能治1型糖尿病?其實這是一種免疫基因治療方式，研究者們在淋巴結內注射抗原是為了增強穀氨酸脫羧酶(GAD65)抗原的T細胞呈遞。下麵就讓我們來了解一下吧。

淋巴結內注射抗原，治療1型糖尿病？

1型糖尿病是T細胞介導的自身免疫性疾病，迄今報告的胰島候選自身抗原已逾20種，其中穀氨酸脫羧酶(GAD65)被認為是最重要的自身抗原，並極可能是1型糖尿病的始動靶抗原。

在保持剩餘的β細胞功能，促進殘餘胰島素的分泌方麵，增強GAD65對T細胞的呈遞著實有所獲益。但通常情況下隻通過皮下注射，直接向淋巴結注射的方式實在新穎!那麼這個做法可行嗎?

研究者在超聲引導下，將4μg礬土配製的GAD65(GAD-明礬)直接注射到6位患者的腹股溝淋巴中。所有患者年齡都在20-22歲之間，GAD65抗體陽性且空腹C肽>0.12nmol/L，隨後以1個月為間隔，進行兩次節點間加強注射，還添加口服維生素D治療作為潛在的免疫調節劑。

6個月時，6名患者的空腹和最大刺激C肽值都沒有降低。15個月後，4位患者的空腹C肽水平增加34%。所有患者的糖化血紅蛋白水平和外源胰島素劑量都呈降低趨勢。除了輕度瞬時注射反應，沒有任何明顯的治療相關的不良事件。

不過這項研究納入的患者樣本量很少，後續仍需要更大規模的試驗來驗證這種方法是否可行!

在過去的十幾年中，外源補充胰島素一直是1型糖尿病治療的主要方法。隨著人們對1型糖尿病發病機製的深入了解和生命科學的相關技術發展，科研工作者和臨床醫生開始探索治療1型糖尿病的新方法。包括上文提到的免疫基因治療方式在內，還有很多其他逐漸成熟的治療方法，讓我們了解一下吧。

胰島移植

這個技術在20多年前就出現了：1991年，加拿大阿爾貝塔大學醫學院完成了世界上首次人胰島移植實驗。這項研究第一次真正使得接受了胰島移植的糖尿病患者在相當長的時間內完全擺脫了對外源胰島素的依賴，極大地提高了患者尤其是已經有並發症的患者的生活質量。但由於1型糖尿病患者體內存在針對胰島細胞的抗體、機體自身的排異反應及免疫抑製劑對β細胞本身的毒害作用，接受胰島移植的患者在幾個月後又開始胰島素治療。

近年的深入研究指出，這項技術需要改進的地方很多，如胰島用量相對較大，同時胰島來源困難、移植成本較高。但隨著科技的發展，異種移植的成熟，相信未來可以看到更多臨床胰島移植成功的好消息。

幹細胞移植

由於幹細胞的“萬用”功能，臨床上通常提取幹細胞進行培養、擴增和誘導分化成需要的幹細胞，然後提取高數量和質量的幹細胞回輸給患者。

2007年4月，《JAMA》刊登了一份研究報告宣稱在糖尿病治療上取得突破——醫學人員在巴西對15名1型糖尿病患者進行幹細胞移植實驗，結果有13名患者都已擺脫胰島素依賴，也不需服用其他藥物，且第一位接受實驗的患者不注射人工胰島素已有3年。

其實使用幹細胞治療糖尿病有很多優點，包括永久性擺脫外源性胰島素依賴、恢複生理性胰島素分泌調控等，同時能消除或減低免疫排斥的程度，且不受社會倫理方麵的製約。但也有人提出質疑，因為幹細胞移植的潛在危害包括不孕不育和晚期發作癌症。不管怎麼說幹細胞是一個很有前景的治療方式，就讓科研人員們用時間來驗證吧……

基因療法

自從人類基因組計劃開啟，所有難治疾病似乎都發現了新的希望，1型糖尿病也不例外。糖尿病不是單一病因所致，其發生與多種基因和環境因素有關。而1型糖尿病還與遺傳、免疫等自身因素有關，因此，用基因療法根治 1 型糖尿病的希望更大。

1. 阻斷β細胞的免疫損害

1型糖尿病的自身抗原有多種，一般認為胰島素及其前體胰島素原是惟一的β細胞特異性自身抗原。CD4+細胞分為Th1和Th2細胞，Th1細胞分泌細胞因子白介素2(LT-2)，γ幹擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF)等，主要介導細胞免疫，與1型糖尿病發病密切相關，Th2細胞分泌IL-4、IL-10、IL-5等，主要介導體液免疫，這兩種細胞因子相互拮抗。

因此，通過Th2細胞因子抑製Th1細胞因子的產生，亦可阻止β細胞的免疫破壞。

2. 體外細胞移植

細胞移植是將在體外建立的功能性細胞移植到體內替代功能缺陷的細胞，以達到治療疾病的目的。

近年來許多研究者致力於利用現代基因工程技術改造或新建各種可分泌胰島素的細胞係，主要有胰島β細胞係、胰島幹細胞係和非胰島細胞係，並探索了這些細胞係用於1型糖尿病治療的可行性。

Yang等證實在高糖環境下成年大鼠肝幹細胞可分化成胰島內分泌細胞，具有分泌胰島素、胰高糖素及胰多肽等激素的功能;Alam等構建含有人胰島素基因、肝白蛋白啟動子及S14血糖調控元件的載體，在體外轉染肝細胞後分泌出胰島素，而轉染到糖尿病鼠體內能降低血糖。

3. 體內基因轉移

體內直接轉基因治療即將帶有遺傳物質的病毒、脂質體或裸DNA直接注射到試驗個體內，並讓其在體內表達的一種治療方法。

關於體內直接轉移胰島素基因治療糖尿病的研究很多，至今以LEE等進行的研究所取得的效果為最佳。他們以AAV為載體，采用肝細胞特異LPK啟動子調控胰島素類似物(SIA)基因表達，將該表達元件轉入STZ誘發的糖尿病大鼠或自身免疫性糖尿病NOD小鼠體內，SIA在兩種鼠體內持續表達時間分別為8個月和5個月，而且SIA的表達受血糖濃度調控，使血糖得到較好的控製，糖尿病症狀明顯改善，葡萄糖耐量試驗顯示糖尿病鼠處理血糖的能力增強，試驗期間沒有發現明顯的毒副作用。

上述部分研究還停留在試驗階段，但是研究者的視角逐漸從宏觀轉向微觀，不再局限於如何從體外獲得胰島素已經是很大進步。相信隨著研究不斷成熟，根治1型糖尿病不再遙遠!