(2) 不具備「A」條件時,可以考慮輸注緊急采集尚來不及完成檢測的 RhD 抗原陰性交叉配血相合的血液。凝聚胺技術首先利用低離子介質(low ionic medium,LIM),降低介質的離子強度,減少紅細胞周圍的陽離子雲,以促進紅細胞和血清(血漿)中的抗體結合。
為挽救生命、積極救治患者,在受到客觀條件限製常規搶救治療措施無法實施,法律尚無明確規定的特殊情況下,允許醫生為挽救患者生命按照下列步驟采取緊急輸血措施。
血型不明時緊急輸注 O 型紅細胞處理流程
1. 適用情況患者必須同時滿足以下所有條件方可啟動此流程:
(1)AB0 血型難以確定(如:AB0 血型係統的亞型表型,或其他生理、病理因素引起的 AB0 血型鑒定困難)。
(2)生命體征不平穩,危及生命的急性失血:
血紅蛋白<30 g/L,並有進一步下降趨勢。血紅蛋白>30g/L,但進一步加重貧血可能會嚴重危及生命(出血速度快,可能迅速危及生命;合並心、肺等嚴重基礎疾病,很難耐受更嚴重貧血)。
(3)向患方充分告知並取得患方的書麵知情同意。知情同意書至少包括以下內容:「O 型懸浮紅細胞成分中殘存少量血漿,但大量輸注(累積大於 200 mL)可能引發溶血性輸血反應」。
2. 緊急處置按照以下 A-B 的順序啟動緊急流程:
(1)優先選擇輸注 0 型洗滌紅細胞。
(2)在不能及時獲得 O 型洗滌紅細胞的情況下,可考慮輸注 O 型懸浮紅細胞,並推薦應用白細胞濾器。在生命體征穩定、危急狀態解除後,應等待獲取 O 型洗滌紅細胞。
3. 注意事項
(1)異型輸血必須是由主管醫師與輸血科充分溝通、權衡患者獲益與風險後共同做出決定。
(2)輸注前應使用能夠檢測不完全抗體的技術進行交叉配血,否則可能因患者體內存在針對供血者的不規則抗體,從而引起溶血性輸血反應。
(3)輸血時和輸血後加強病情觀察,發現異常情況及時處理。
RhD 陰性無同型合格血源供給時緊急輸血流程
1. 適用情況必須同時滿足以下所有條件方可啟動此流程:
(1)受客觀條件限製無法及時輸注 RhD 陰性合格血液。
(2)生命體征不平穩,危及生命的急性失血:
血紅蛋白<30 g/L,並有進一步下降趨勢。血紅蛋白>30g/L,但進一步加重貧血可能會嚴重危及生命(出血速度快,可能迅速危及生命;合並心、肺等嚴重基礎疾病,很難耐受更嚴重貧血)。
(3)向患方充分告知並取得患方的書麵知情同意。
知情同意書至少應包括以下內容:RhD 陰性受血者尤其是育齡期女性在輸注 RhD 陽性血液後,將可能由於同種免疫產生抗 D 抗體,誘發新生兒溶血病,因此將可能喪失再生育能力;或再次輸注 RhD 陽性血液時引起溶血性輸血反應。輸注來不及檢測的血液可能使受血者麵臨感染艾滋病、肝炎等多種嚴重傳染性疾病的可能性,患者必須自行承擔這些風險。
2. 緊急處置按照以下 A-B 的順序啟動緊急流程
(1)在檢測確認待搶救患者血液中 D 抗體篩查陰性的前提下,使用與 RhD 抗原陽性交叉配血相合的合格血液。
(2) 不具備「A」條件時,可以考慮輸注緊急采集尚來不及完成檢測的 RhD 抗原陰性交叉配血相合的血液。
3. 注意事項
(1)異型輸血或輸注未完成檢測的血液必須是由主管醫師與輸血科充分溝通、權衡患者獲益與風險後共同做出決定。
(2)輸血時和輸血後加強病情觀察,發現異常情況及時處理。
相應配血方法
1. 強生卡式(BioVue)交叉配血
(1)嚴格遵守《全國臨床檢驗技術操作規範》,確保實驗結果準確、可靠。
(2)範圍:配血實驗室及獻血員篩選實驗室。
(3)責任人:實驗室工作人員。
(4)標準操作規程
撕開試劑卡上的鋁箔帶,分別加人一滴 BUSS 液。
取 40μL受血者壓積紅細胞和獻血者壓積紅細胞加人 1mL生理鹽水中製成 4% 的紅細胞懸液。
主測管中,加人受血者血清40μL+供血者紅細胞懸液 10μL。
次測管中,加人受血者紅細胞懸液 10μL+供血者血清 40μL。
37℃ 孵育 10min,離心 5min。判讀結果。
(5)注意事項
每日實驗前,應先將有關試劑進行室溫平衡,以防止冷凝集;
開啟後的試劑卡請於lh內使用,如果柱內的試劑液麵位於或低於玻璃珠的頂端,請勿使用該卡。
實驗前將強生卡離心 3-4min,並進行標記。
強生卡封口已損壞時,管中幹涸或有氣泡時,卡不可使用。
樣本紅細胞懸液濃度要在4%左右。
纖維蛋白可吸附部分紅細胞,應將血樣離心。
液體應加至卡反應室中。
嚴格按標準程序操作可檢出弱抗原抗體反應,弱凝集。
抗人球交叉配血不合,應設計實驗進行分析。
某些藥物、疾病可導致異常結果。
細菌及異常血清蛋白可影響結果。
2. Base 凝聚胺(Polybrene)交叉配血標準操作規程
(1)嚴格遵守《全國臨床檢驗技術操作規範》,確保實驗結果準確、可靠。
(2)範圍:輸血科實驗室。
(3)責任人:實驗室工作人員。
(4)標準操作規程
原理紅細胞表麵帶有大量的負電荷,以避免其產生自發性聚集,當紅細胞懸浮在電解質溶液時,陽離子會被紅細胞表麵的負電荷所吸引,此時紅細胞則被擴散的雙層離子雲所圍繞,而形成 Zeta 電位,Zeta 電位決定紅細胞之間的排斥作用。
凝聚胺技術首先利用低離子介質(low ionic medium,LIM),降低介質的離子強度,減少紅細胞周圍的陽離子雲,以促進紅細胞和血清(血漿)中的抗體結合。
其後,加人凝聚胺試劑,它是一種高價陽離子多聚物,是肝素中和劑,溶解後能產生很多正電荷,可以中和紅細胞表麵帶有的負電荷,使紅細胞 Zeta 電位降低,縮短紅細胞之間的距離,使紅細胞產生非特異性凝聚。
最後,加人懸浮液(Resuspending),懸浮液具有中和凝聚胺的作用,使正常的紅細胞非特異性聚集散開,試驗結果為陰性;但如果紅細胞被相應的抗體致敏,則會被凝聚胺凝結,聚集就不會散開,試驗結果為陽性。
試劑及器材試劑: 低離子介質溶液,凝聚胺溶液(Polybrene Solution),懸浮液(Resuspending Solution),陽性質控液(Positiv eControl)。
器材:試管,離心機,載玻片,顯微鏡。
(5)交叉配血試驗
取試管兩支,標記主、次側,主側管加患者血清(血漿)2 滴,加供血者 3%-5% 紅細胞懸液(洗滌或不洗滌均可)1 滴,次側反之。
每管各加低離子介質0.7mL,混合均勻後,再各加凝聚胺溶液 2 滴,並混合。
3400r/min,離心 10S,然後棄去上清,不要瀝幹,試管底殘留約 0.1mL液體。
輕輕搖動試管,目測紅細胞有無凝集,如無凝集,則必須重做。
最後加人懸浮液 2 滴,輕輕轉動試管混合並同時觀察結果。如果在 30s內凝集散開,代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集,配血結果相合;如凝集不散開,則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應,配血結果不相合。如反應可疑,可進一步倒在載玻片上用顯微鏡觀察。
(6)注意事項
可以用含 EDTA 的血漿代替血清使用。
若患者血清(血漿)含肝素,如血液透析患者,須多加4-6 滴凝聚胺溶液以中和肝素。
試劑使用前請室溫平衡。
如懷疑冷凝集素幹擾試驗結果,請在最後加人懸浮液時,將試管立即置人 37t水浴中,輕輕轉動試管混合,並在 30s內觀察結果。
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