近日，河南省人民醫院康豔紅等發文，旨在探討HBVX蛋白(HBx)對抑癌基因p16的表達、p16啟動子甲基化的影響,從表觀遺傳學的角度探討HBx參與HBV相關性HCC發生發展的相關機製。研究指出，在肝癌細胞係中,HBx通過誘導抑癌基因p16啟動子甲基化而下調其表達，DNMT抑製劑5-Aza-2′-DC能恢複p16基因啟動子區域的未甲基化狀態,這種可逆性修飾可為HBV相關性HCC的治療、預防提供新思路。本文於2016年2月6日在線發表在《臨床肝膽病雜誌》上。

本研究以人肝母細胞瘤細胞HepG2、表達綠色熒光蛋白(GFP)的HepG2/GFP、穩定表達HBx蛋白的HepG2/GFP-HBx細胞為實驗係統;采用Western Blot法檢測HepG2、HepG2/GFP、HepG2/GFP-HBx細胞中p16蛋白的表達水平。以DNA甲基轉移酶(DNMT)抑製劑5-氮雜-2′脫氧胞苷(5-Aza-2′-DC)處理HepG2/GFP-HBx細胞，采用甲基化特異性PCR(MSP)法檢測HepG2、HepG2/GFP細胞及藥物處理和未處理的HepG2/GFP-HBx細胞中抑癌基因p16啟動子區域的甲基化情況。計量資料多組間比較采用單因素方差分析。

Western Blot分析示HepG2/GFP-HBx細胞中p16蛋白相對灰度值(23.68±3.93)顯著低於HepG2(91.23±6.87)、HepG2/GFP(94.55±8.40)細胞，差異均有統計學意義(P值分別為0.0007、0.0014)，HepG2/GFP與HepG2細胞中p16蛋白相對灰度值差異無統計學意義(P>0.05);MSP法檢測示HepG2/GFP-HBx細胞中存在p16基因啟動子區域部分CpG位點甲基化，HepG2、HepG2/GFP細胞中未檢出其甲基化，DNMT抑製劑5-Aza-2′-DC 處理的HepG2/GFP-HBx細胞卻能恢複p16基因啟動子區域的未甲基化狀態。