近日,南京醫科大學第一附屬醫院消化科唐娜娜、朱宏、金海林等人共同發表論文,旨在探討人食管鱗狀細胞癌中缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)的表達變化及對糖酵解的影響。研究指出,食管鱗癌中HIF-1α及HK-Ⅱ在缺氧條件下表達明顯增強,HK-Ⅱ表達及乳酸濃度與HIF-1α表達密切相關,HIF-1α可能通過HK-Ⅱ影響細胞的糖酵解水平。該文發表在2012年第32卷第2期《中華消化雜誌》上。
近日,南京醫科大學第一附屬醫院消化科唐娜娜、朱宏、金海林等人共同發表論文,旨在探討人食管鱗狀細胞癌中缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)和己糖激酶-Ⅱ(HK-Ⅱ)的表達變化及對糖酵解的影響。研究指出,食管鱗癌中HIF-1α及HK-Ⅱ在缺氧條件下表達明顯增強,HK-Ⅱ表達及乳酸濃度與HIF-1α表達密切相關,HIF-1α可能通過HK-Ⅱ影響細胞的糖酵解水平。該文發表在2012年第32卷第2期《中華消化雜誌》上。
缺氧條件(1%氧濃度)下培養TE13及Eca109細胞,設置不同缺氧時間(分別為6、12、24、48h),並以常氧培養(20%氧濃度)為對照。Western印跡檢測HIF-1α及HK-Ⅱ的蛋白表達變化;經RNA幹擾技術特異性靜默HIF-1α,利用實時定量PCR及Western印跡檢測HIF-1α和HK-Ⅱ的表達變化;分光光度法檢測常氧和缺氧條件下細胞培養液中細胞的乳酸濃度變化。
結果:①缺氧條件下,TE13及Eca109細胞中HIF-1α表達均隨缺氧時間延長而逐漸升高,在缺氧12h表達達到高峰,後表達又隨時間延長而下降。TE13及Eca109細胞缺氧12h後HK-Ⅱ表達均較常氧培養明顯增強。②實時定量PCR法檢測顯示,常氧條件下被幹擾的TE13/shRNA和Eca109/shRNA細胞中HIF-1αRNA表達量較未幹擾的TE13、Eca109細胞明顯減弱。HK-ⅡRNA表達結果與HIF-1 RNA一致。③常氧及缺氧培養時,HK-Ⅱ蛋白在TE13/shRNA和Eca109/shRNA細胞的表達均較未幹擾的TE13、Eca109細胞明顯減弱,差異有統計學意義。④缺氧時TE13和Eca109細胞乳酸分泌量較常氧時增多。TE13/shRNA、Eca109/shRNA乳酸分泌量較未靜默TE13、Eca109細胞顯著減少,差異均有統計學意義。
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