近日，李雪黎、雷宇、鍾珊等人發表論文，旨在構建丙型肝炎病毒（HCV）單順反子複製子，研究其在Huh7.5和Huh7.1細胞中的複製功能，為研究HCV複製規律和抗病毒藥物的篩選建立模型。研究組成功構建了HCV-IRES單順反子複製子，轉染Huh7.5和Huh7.1細胞後在不同時間均有複製。該文發表在2012年第20卷第2期《中華肝髒病雜誌》上。
近日，李雪黎、雷宇、鍾珊等人發表論文，旨在構建丙型肝炎病毒（HCV）單順反子複製子，研究其在Huh7.5和Huh7.1細胞中的複製功能，為研究HCV複製規律和抗病毒藥物的篩選建立模型。研究組成功構建了HCV-IRES單順反子複製子，轉染Huh7.5和Huh7.1細胞後在不同時間均有複製。該文發表在2012年第20卷第2期《中華肝髒病雜誌》上。
用Quick change點突變方法刪除pJ6JFH 1B1aRL質粒上的Core-E1-E2-p7-NS2片段（約3090 bp），得到△pJ6JFH1B1aRL，然後測序，選擇序列正確的克隆，用AgeⅠ和AvrⅡ酶切回收目的片段約2280bp，同時用AgeⅠ和AvrⅡ酶切pSGRJFH1和其突變體質粒，回收載體片段。將目的片段和載體片段連接，構建由HCV-IRES啟動的單順反子複製子pSGRm-JFH IblaRL以及其變異突變體pSGRm-JFH 1b1aRLGND，用其RNA轉染Huh7.5和Huh7.1細胞，研究複製子在細胞中的複製情況。
經過Quick change和多步克隆方法成功構建HCV-IRES啟動的單順反子複製子，複製子RNA轉染Huh7.5和Huh7.1細胞72h後複製達高峰，96h複製開始下降，而對照的突變體從24h至96h均沒有複製。
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