肝病

慢性乙肝肝細胞內cccDNA可出現核苷(酸)類藥物耐藥變異

作者:小哲 摘編 來源:醫學論壇網 日期:2012-07-11
導讀

         近日,第二軍醫大學附屬長征醫院感染科和山東省威海市解放軍第四○四醫院感染科的研究人員共同發表論文,旨在了解肝細胞內HBV共價閉合環狀DNA(HBV cccDNA)核苷(酸)類藥物耐藥變異的情況,並比較其與鬆弛環狀DNA(rcDNA)耐藥變異的異同。研究指出,慢性HBV感染者肝細胞內cccDNA可出現核苷(酸)類藥物耐藥變異,且肝組織內的cccDNA、rcDNA耐藥變異株與血清中的rcDNA耐藥變異株不完全一致。該文發表在2012 年第30卷第1期《中華傳染病雜誌》上。

  近日,第二軍醫大學附屬長征醫院感染科和山東省威海市解放軍第四○四醫院感染科的研究人員共同發表論文,旨在了解肝細胞內HBV共價閉合環狀DNA(HBV cccDNA)核苷(酸)類藥物耐藥變異的情況,並比較其與鬆弛環狀DNA(rcDNA)耐藥變異的異同。研究指出,慢性HBV感染者肝細胞內cccDNA可出現核苷(酸)類藥物耐藥變異,且肝組織內的cccDNA、rcDNA耐藥變異株與血清中的rcDNA耐藥變異株不完全一致。該文發表在2012 年第30卷第1期《中華傳染病雜誌》上。

  取40例慢性HBV感染肝移植患者的部分肝組織,采用十二烷基硫酸鈉——蛋白質沉澱法結合DNA提取試劑盒分離提取肝內的HBV cccDNA和rcDNA。將抽提產物用不降解質粒的ATP依賴DNA酶酶切純化後,用跨HBV基因組雙鏈缺口並涵蓋常見核苷類耐藥位點(rt169~rt250)的引物行單輪PCR或套式PCR選擇性擴增cccDNA。另用不跨雙缺口的引物PCR擴增肝組織內的HBV rcDNA和患者肝移植術前的血清HBV rcDNA。用直接測序法對上述擴增產物進行基因測序並分析核苷(酸)類藥物耐藥位點的檢出情況。

  40例患者中,31例肝組織內檢測到HBV cccDNA,35例肝組織檢測到HBV rcDNA,21例肝移植術前血清中檢測到HBV rcDNA。測序結果顯示,2例肝組織內cccDNA、rcDNA和血清rcDNA均檢測到rtM204Ⅰ變異;有2例患者肝內cccDNA、rcDNA分別存在rtM204Ⅰ、rtQ215H變異,而血清rcDNA未檢測到相應變異;3例血清中分別存在rtM204V、rtM204V、rtV173L+rtL180M+rtM204V變異,而肝內cccDNA和rcDNA未檢測到相應變異。

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  相關鏈接:乙型肝炎病毒共價閉合環狀DNA與鬆弛環狀DNA對核苷(酸)類藥物耐藥變異的比較

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