近日，浙江大學附屬邵逸夫醫院檢驗科、杭州市第一人民醫院檢驗科和杭州市紅十字會醫院結核實驗室的研究人員共同發表論文，旨在利用多重熒光PCR技術，建立一種快速、準確、特異的檢測常見分枝杆菌的方法。本研究建立的多重熒光PCR方法敏感、特異、快速，能有效檢測結核分枝杆菌和常見非結核分枝杆菌，可用於分枝杆菌感染者的實驗室快速診斷。該文章發表在2012年35卷08期的《中華檢驗醫學雜誌》上。
近日，浙江大學附屬邵逸夫醫院檢驗科、杭州市第一人民醫院檢驗科和杭州市紅十字會醫院結核實驗室的研究人員共同發表論文，旨在利用多重熒光PCR技術，建立一種快速、準確、特異的檢測常見分枝杆菌的方法。本研究建立的多重熒光PCR方法敏感、特異、快速，能有效檢測結核分枝杆菌和常見非結核分枝杆菌，可用於分枝杆菌感染者的實驗室快速診斷。該文章發表在2012年35卷08期的《中華檢驗醫學雜誌》上。
以分枝杆菌16S rRNA作為檢測靶基因，設計雙啟動寡核苷酸(DPO)引物和TaqMan探針，探針的5’端分別用FAM 、ROX、HEX和JOE進行熒光標記，3’端標記淬滅熒光。通過對4種分枝杆菌標準株基因組DNA的擴增，評價多重熒光PCR方法的特異性和靈敏度。采用建立的多重熒光PCR方法，采用該方法檢測2010年6至12月杭州市紅十字會醫院68例結核科住院患者清晨痰液標本，結果與細菌培養和抗酸染色鏡檢進行比較。采用x2檢驗比較3種方法的陽性率。
該方法可準確、特異地鑒定結核分枝杆菌和3種常見非結核分枝杆菌，檢測靈敏度均為1 ×101 cfu/ml。對68份痰液標本進行檢測，結果顯示31份檢測結果陽性，陽性率45.6％，明顯高於塗片染色鏡檢(陽性率14.7％)，差異具有統計學意義(x2=15.4，P ＜0.05)，其中28例為結核分枝杆菌，1例為鳥分枝杆菌，2例為胞內分枝杆菌，與細菌培養鑒定方法一致。1例培養陽性而PCR檢測結果陰性標本經16SrRNA擴增測序鑒定為龜分枝杆菌。
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