反向遺傳學是一種不可或缺的工具,它徹底改變了我們對病毒發病機製和疫苗開發的認識。大型RNA病毒基因組,如冠狀病毒基因組,在大腸杆菌宿主中克隆和操作都很麻煩,因為它們體積龐大,而且有時不穩定。因此,為RNA病毒提供另一種快速、適用的反向遺傳學平台將有利於研究人員加快相關研究。
反向遺傳學是一種不可或缺的工具,它徹底改變了我們對病毒發病機製和疫苗開發的認識。大型RNA病毒基因組,如冠狀病毒基因組,在大腸杆菌宿主中克隆和操作都很麻煩,因為它們體積龐大,而且有時不穩定。因此,為RNA病毒提供另一種快速、適用的反向遺傳學平台將有利於研究人員加快相關研究。
近日來自瑞士伯爾尼大學和病毒與免疫學研究所等機構的研究人員合作在預印本網站bioRixv展示了一項未經同行評議的最新研究,該研究展示了一個基於酵母的合成基因組學平台的完整功能,用於包括冠狀病毒科、黃病毒科和副粘病毒科的成員在內的多種RNA病毒的遺傳重建。
病毒亞基因組片段是使用病毒分離物、克隆病毒DNA、臨床樣本或合成DNA產生的,並在釀酒酵母中使用轉換相關重組(TAR)克隆一步重新組裝,以維持基因組作為酵母人工染色體(YAC)。T7-RNA聚合酶被用來產生感染性RNA,然後被用來拯救活病毒。
基於這個平台,研究人員已經能夠在收到合成的DNA片段後的一周內,對最近流行的SARS-CoV-24的化學合成克隆進行工程設計和再生。
研究人員在這裏描述的技術進步使我們能夠對新出現的病毒作出迅速反應,因為它能夠在暴發期間實時地生成和描述進化的RNA病毒變體的功能。
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