中國疾病預防控製中心病毒預防控製所副所長梁國棟報告:在SARS 病毒的組織培養方麵,他們從SARS病人的咽拭子中可以分離出4個不同的冠狀病毒株。他們與中國科學院北京基因組研究所合作進行了一例SARS病毒全基因進行測序,病毒直接從SARS病人的肺中獲得。
中國疾病預防控製中心病毒預防控製所副所長梁國棟報告:在SARS 病毒的組織培養方麵,他們從SARS病人的咽拭子中可以分離出4個不同的冠狀病毒株。它可在Vero-E6細胞和RD細胞中繁殖,同時在接種3~4天後產生明顯典型而且穩定的CPE(細胞病變效應)。
經過有對照的血清學EIA法的分析,認為SARS病人的血清學與冠狀病毒是相對應的。在此基礎上,CDC病毒研究所與北京貝爾生物工程有限公司已聯合完成了酶免測定SARS病毒抗體IgM/IgG試劑盒。但是,抗體診斷有一定的滯後性,特別是IgG;IgM一般是很好的早期診斷指標,但在SARS病人出現相對晚一些。根據WHO電話會議的信息,在SARS發病的最初5天之內很難發現IgM。盡管如此,這個試劑盒的出現對醫師明確病原,以及今後SARS的血清流行病學調查很有幫助。
目前大量的實驗顯示可在血液、尿液和糞便中發現SARS病毒的核酸序列,這高度提示SARS病毒可能存在於血液、尿液和糞便中,這進一步提示這些樣本可能具有傳染性。衛生部將很快提出一個關於SARS血、尿和糞便及肝腎功常規檢查安全性操作規範,希望把這種再次感染的可能性無限降低到趨近於零。
根據美國CDC在網上公布的PCR引物,他們加以改進,並對取自SARS死亡病人的組織標本、在Vero-E6細胞和RD細胞中培養的病毒株和咽拭子標本進行了序列測定,結果顯示均與國外發現的SARS病毒的基因序列一致。在此基礎上,CDC病毒研究所與華美生物工程公司聯合研製了RT-PCR測定SARS病毒試劑盒,它可能可以用於SARS的早期診斷。從取樣的可行性和安全性上看,取血進行PCR測定最為理想。
這兩種檢測方法將試驗性地應用於臨床。雖然目前我國縣級醫院均具有進行這兩種檢測的技術和設備,但因生物安全性的問題,他們建議首先在較發達地區,具有P3實驗室的省級疾病控製中心進行,待對於SARS血、尿和糞便檢測安全性評估完成之後,再應用於全國。
他們與中國科學院北京基因組研究所合作進行了一例SARS病毒全基因進行測序,病毒直接從SARS病人的肺中獲得。以下資料對以後的疫苗研製可能會有所幫助:與美國CDC和加拿大的SARS病毒基因序列的同源性高達99%;核蛋白C端的編碼序列與副流感病毒3型具有相似之處;與其他已知的冠狀病毒相比,外膜蛋白的編碼區域的變異度較大;與其他已知的冠狀病毒相比,細胞免疫決定族抗原無本質差別;可能存在編碼免疫抑製相關成份的序列。
另外,在研究初期,他們看到一種難以解釋但可能有意義的現象,對此他們依然沒有放棄,即在觀測來自不同地區、不同醫院的7例SARS死亡病例的標本中,電鏡觀察顯示:肺泡上皮細胞損害嚴重,胞漿內均可見典型的充滿衣原體樣顆粒(chlamydia-like agents)的包含體,大小不等的原生小體(EB)和網質小體(RB)均可見到。在肺毛細血管和肺滲出液中也見到衣原體樣顆粒;在心、脾、肝、腎和淋巴結等組織中均可見到典型的衣原體顆粒和包含體。在組織中大量地發現衣原體樣顆粒,不得不使要對這種現象做出解釋。在組織培養細胞中也發現了衣原體樣顆粒和包含體。有趣的現象是,在3例SARS病人的標本中同時,甚至在電鏡的同一視野發現冠狀病毒樣顆粒和衣原體樣顆粒同時存在;在沒有肺組織內出血的標本中,隻能找到冠狀病毒樣顆粒,而無衣原體樣顆粒。但對於衣原體樣顆粒,他們尚未獲得充分的證據。如果它確實是衣原體,它應是一種新型衣原體。
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