近期，湖南省腫瘤醫院研究人員發表論文，旨在已有的研究表明：Toll樣受體5（toll-likereceptor5，TLR5）在腫瘤起始和發展中發揮重要作用。我們前期研究發現，TLR5在非小細胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）組織中高表達，但其在NSCLC高表達後的信號通路活化情況的研究並不多見。本研究旨在探討TLR5在不同NSCLC細胞株上的表達，及其在NS
近期，湖南省腫瘤醫院研究人員發表論文，旨在已有的研究表明：Toll樣受體5（toll-like receptor 5，TLR5）在腫瘤起始和發展中發揮重要作用。我們前期研究發現，TLR5在非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）組織中高表達，但其在NSCLC高表達後的信號通路活化情況的研究並不多見。本研究旨在探討TLR5在不同NSCLC細胞株上的表達，及其在NSCLC細胞中活化的機製。研究指出，外源性配體鞭毛蛋白可激活NSCLC細胞株TLR5蛋白，啟動下遊信號通路，可能與NSCLC的發生發展有關。該文發表在2015年第01期《中國肺癌雜誌》上。
用免疫熒光、RT-PCR和Western blot方法檢測TLR5在三種不同NSCLC細胞株中的表達。分別用0μg/m L、0.01μg/m L、0.1μg/m L、1μg/m L、5μg/m L、10μg/m L的鞭毛蛋白刺激，用NF-κB熒光素酶報告基因質粒瞬時轉染後，檢測細胞內NF-κB熒光素酶的活性。選擇TLR5表達最高的SPC-A-1細胞株為實驗對象，選擇0.1μg/m L的鞭毛蛋白，分別用0μg/m L、0.01μg/m L、0.1μg/m L、1μg/m L、10μg/m L的TLR5抗體抑製通路活化，檢測細胞內NF-κB熒光素酶的活性，驗證TLR5活化通路。構建TLR5-sh RNA，轉染SPC-A-1細胞48 h後，以0.1μg/m L濃度鞭毛蛋白分別刺激SPC-A-1細胞及轉染的SPC-A-1細胞，在刺激0 min、10 min、30 min、60 min，用Western blot方法比較TLR5信號通路因子p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK、IKBα、ERK1/2的變化。
結果顯示， TLR5在肺腺癌細胞株SPC-A-1中呈高表達，且主要表達在細胞膜上。三種細胞株中SPC-A-1細胞NF-κB熒光素酶的活性最高，呈濃度依賴性，0.1μg/m L鞭毛蛋白即可明顯增強NF-κB熒光素酶的活性（P<0.05）；而SPC-A-1細胞內NF-κB熒光素酶的活性可被TLR5抗體抑製，與TLR5抗體濃度負相關（P<0.05）。與0 min相比較，SPC-A-1細胞內p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK水平在鞭毛蛋白刺激10 min即明顯增高，30 min達到高峰，60 min開始下降（P<0.05），且與10 min和60 min組相比，p-IKBα、p-ERK1/2、p-JNK水平在30 min增高（P<0.05）；而IKBα、ERK1/2的水平無明顯變化（P>0.05）。以適合濃度鞭毛蛋白刺激轉染的SPC-A-1細胞，p-IKBα、p-JNK蛋白均未檢出，IKBα、ERK1/2蛋白的水平無明顯變化（P>0.05），p-ERK1/2蛋白水平隨著時間延長明顯增高（P<0.05）。
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