背景:嚴重的激素抵抗性哮喘(SSRA)是哮喘管理中的嚴重臨床問題。受影響的患者具有嚴重的臨床症狀，生活質量惡化，並且對激素治療(哮喘的主要治療手段)無反應。因此，迫切需要有效的療法。來源於間充質幹細胞(MSC-Exo)的外泌體通過其免疫調節作用已成為肺部疾病治療的有潛力的替代物。在這項研究中，我們探討了MSC-Exo在SSRA中的治療作用，並確定了MSC-Exo的治療機製。

方法:分離人臍帶間充質幹細胞(hUCMSC)的外泌體，並通過透射電子顯微鏡，納米粒子跟蹤分析和流式細胞儀分析對其進行表征。評估了MSC-Exo對SSRA小鼠氣道高反應性(AHR)，炎症，組織病理學和巨噬細胞極化的影響。巨噬細胞的係統耗竭決定了巨噬細胞在小鼠SSRA的治療作用中的作用。構建LPS刺激的RAW264.7細胞模型，以確定MSC-Exo對巨噬細胞極化的潛在機製。進行了qRT-PCR，Western印跡，免疫熒光和流式細胞術以評估M1或M2標記的表達。應用串聯質量標簽(TMT)標記的定量蛋白質組學來研究MSC-Exo對巨噬細胞極化的調節作用過程中中心蛋白的作用。敲低和過度表達TRAF1被用來進一步闡明中央蛋白在巨噬細胞極化中的作用。

結果:我們成功地從hUCMSCs中分離並鑒定了外泌體。我們證實，氣管內給予MSC-Exo可逆轉SSRA小鼠的氣道高反應性，組織病理學變化和炎症。係統性消耗巨噬細胞削弱了MSC-Exo的治療效果。我們發現，MSC-Exo處理在LPS刺激的RAW264.7細胞中抑製了M1極化並促進了M2極化。隨後，腫瘤壞死因子受體相關因子1(TRAF1)被確定為中心蛋白，可能與TMT標記的定量蛋白質組學分析與巨噬細胞極化的調節密切相關。敲低和過度表達TRAF1表明，MSC-Exo處理對巨噬細胞極化，NF-κB和PI3K/AKT信號傳導的影響取決於TRAF1。

結論:MSC-Exo可通過減輕炎症來改善SSRA，這是通過抑製TRAF1的表達重塑巨噬細胞極化來實現的。